Kỹ thuật định lượng huyết sắc tố

I. Nguyên lý
Fe²⁺ + Oxy hóa >>> Fe3+ ( màu nâu đỏ )
Pha loãng màu nâu đỏ giống ống mẫu và đọc kết quả

Nguyên tắc: Người ta đo mật độ quang học của mẫu nghiệm sau khi đã chuyển huyết sắc tố thành methemoglobin - một dẫn xuất bền vững mà sự hấp phụ tốt nhất ở bước sóng 540 nm. Do mật độ quang tỷ lệ thuận với nồng độ của huyết sắc tố nên dễ dàng tính ra được lượng huyết sắc tố của mẫu nghiệm.

II Chuẩn bị




III. Tiến hành

- Cho HCl 0,1N đến vạch 2 của ống pha trộn
- Hút 0,02 ml máu bằng pipet chính xác, lau máu dính ở đầu ống
- Thổi từ từ máu vào giữa phần dung dịch HCl 0,1N trong ống pha trộn (không làm sủi bọt)
- Tráng pipet 3 lần bằng phần dung dịch trong ở phía bên trên bằng cách hút lên thổi xuống
- Lắc đều để 5 phút, hỗn dịch sẽ chuyển thành màu nâu xẫm
- Pha loãng hỗn dịch và so sánh màu sắc của ống máu với ống mẫu của huyết sắc kế bằng dung dịch HCl 0,1N hoặc nước cất đến khi màu của 2 ống bằng nhau.
- Bỏ ống máu thử ra xem lượng dịch đạt tới vạch bao nhiêu (trên ống có khắc vạch số gam hoặc cả vạch số gam và vạch phần trăm trong 100ml máu)


IV. Đọc kết quả và nhận xét kết quả

Bình thường: nam 139 – 163 g/l, nữ 125 – 145 g/l
- Thiếu máu nếu nồng độ huyết sắc tố
+ < 130 g/l ở nam giới
+ < 120 g/l ở nữ giới
+ 110 g/l ở người lớn tuổi

- Nghi ngờ là đa hồng cầu nếu huyết sắc tố
+ > 180 g/l ở nam giới
+ > 160 g/l ở nữ giới